fa تمایز سلول‌های بنیادی کارسینومای جنینی به سلول‌های انسولین‌ساز با استفاده از عصاره‌ی پانکراس در شرایط آزمایشگاهی غدد درون‌ریز Endocrinology پژوهشی Original <p style="LINE-HEIGHT: 16pt TEXT-INDENT: 3.7pt MARGIN: 0cm 36pt 0pt 1cm mso-line-height-rule: exactly" dir="rtl" class="Abstract"><strong><u><span style="FONT-FAMILY: Lotus FONT-SIZE: 11pt mso-ansi-font-size: 9.0pt mso-font-kerning: 16.0pt" lang="FA">مقدمه</span></u><span style="FONT-FAMILY: Lotus FONT-SIZE: 11pt mso-ansi-font-size: 9.0pt mso-font-kerning: 16.0pt" lang="FA">: دیابت نوع 1 در نتیجه‌ی تخریب خودایمنی سلول­های بتای جزایر پانکراس ایجاد می‌گردد. تاکنون پژوهش‌های گسترده­ای برای تولید سلول­های انسولین­ساز از سلول­های بنیادی انجام گرفته است. سلول­های کارسینومای جنینی </span><font face="Arial"><span style="mso-font-kerning: 16.0pt" dir="ltr">P19</span><span dir="rtl"></span></font><span style="FONT-FAMILY: Lotus FONT-SIZE: 11pt mso-ansi-font-size: 9.0pt mso-font-kerning: 16.0pt" lang="FA"><span dir="rtl"></span> سلول­هایی پرتوان هستند که می­توانند به انواع سلول­هایی از سه لایه جنینی تمایز یابند. در پژوهش حاضر تمایز سلول­های </span><font face="Arial"><span style="mso-font-kerning: 16.0pt" dir="ltr">P19</span><span dir="rtl"></span></font><span style="FONT-FAMILY: Lotus FONT-SIZE: 11pt mso-ansi-font-size: 9.0pt mso-font-kerning: 16.0pt" lang="FA"><span dir="rtl"></span> به سلول­های انسولین­ساز با استفاده از عصاره‌ی پانکراس موش مورد بررسی قرار گرفت. <u>مواد و روش‌ها</u>: اجسام شبه­جنینی به دست آمده از سلول­های </span><font face="Arial"><span style="mso-font-kerning: 16.0pt" dir="ltr">P19</span><span dir="rtl"></span></font><span style="FONT-FAMILY: Lotus FONT-SIZE: 11pt mso-ansi-font-size: 9.0pt mso-font-kerning: 16.0pt" lang="FA"><span dir="rtl"></span> در محیط حاوی 03/0سرم همراه با غلظت­های</span><span dir="ltr"></span><span style="mso-font-kerning: 16.0pt" dir="ltr" lang="FA"><span dir="ltr"></span><font face="Arial"> </font></span><span dir="rtl"></span><span style="FONT-FAMILY: Lotus FONT-SIZE: 11pt mso-ansi-font-size: 9.0pt mso-font-kerning: 16.0pt" lang="FA"><span dir="rtl"></span>50, 100, 200 و300 میلی­گرم بر میلی­­لیتر عصاره‌ی پانکراس به مدت 14-7 روز کشت داده شد. رنگ­آمیزی دیتیزون برای شناسایی سلول‌های انسولین­ساز استفاده گردید. آنتی­بادی­های منوکلونال موشی انسولین-پروانسولین و گیرنده‌ی بتای انسولین برای ایمنوفلورسنس استفاده شد. محتوای انسولین سلولی و انسولین ترشح شده توسط سلول­های تمایز یافته در پاسخ به غلظت 5/5 و 25 میلی‌مولار گلوکز با استفاده از کیت الایزا اندازه­گیری گردید. <u>یافته­ها</u>: سلول­های تیمار شده با عصاره‌ی پانکراس به رنگ‌آمیزی دیتیزون پاسخ مثبت داده و به صورت اجتماعات سلولی قرمز ارغوانی مشاهده شدند. ایمنوفلورسنس بیان نشانگرهای سلول­های بتا (انسولین ـ پروانسولین و گیرنده‌ی بتای انسولین) را در این سلول­ها نشان داد. سلول‌های به دست آمده از تمایز توانایی تولید و ترشح انسولین را داشتند، این سلول‌ها در پاسخ به افزایش غلظت گلوکز محیط انسولین بیشتری ترشح کردند. <u>نتیجه­گیری</u>: سلول‌های </span><font face="Arial"><span style="mso-font-kerning: 16.0pt" dir="ltr">P19</span><span dir="rtl"></span></font><span style="FONT-FAMILY: Lotus FONT-SIZE: 11pt mso-ansi-font-size: 9.0pt mso-font-kerning: 16.0pt" lang="FA"><span dir="rtl"></span> در حضور عصاره‌ی پانکراس به سلول‌هایی با قابلیت تولید و ترشح انسولین تمایز می‌یابند. این سلول‌ها می‌توانند به تنش‌های گلوکز محیط<font face="Lotus"><span style="mso-spacerun: yes"><font size="3">  </font></span>به صورت افزایش ترشح انسولین پاسخ دهند. <p></p></font></span></strong></p> <p style="TEXT-ALIGN: justify MARGIN: 0cm 1cm 0pt unicode-bidi: embed DIRECTION: ltr" class="Abstract"><strong><font face="Arial"><u>Introduction</u>: Type I diabetes mellitus results from the autoimmune destruction<span dir="rtl"></span></font><span style="FONT-FAMILY: Lotus FONT-SIZE: 11pt mso-ansi-font-size: 9.0pt" dir="rtl"><span dir="rtl"></span> </span><font face="Arial">of the β cells in pancreatic islets. Currently, extensive research is being conducted on the generation of insulin-producing cells (IPCs) from stem cells. P19 embryonal carcinoma cells are multipotent and can differentiate into cell types of all three germ layers. In this study, the differentiation of P19 cells into IPCs by using mouse pancreas extract (MPE) was investigated. <u>Materials and Methods</u>: Embryoid bodies (EBs) obtained from P19 cells were cultured in medium containing 3% fetal bovine serum, supplemented by concentration of </font></strong><a name="OLE_LINK212"></a><a name="OLE_LINK211"><span style="mso-bookmark: OLE_LINK212"><font face="Arial"><strong>50, 100, 200,300 </strong></font></span></a><a name="OLE_LINK9"></a><a name="OLE_LINK198"></a><a name="OLE_LINK2"></a><a name="OLE_LINK1"><span style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><span style="mso-bookmark: OLE_LINK198"><span style="mso-bookmark: OLE_LINK9"><span style="mso-bookmark: OLE_LINK212"><span style="mso-bookmark: OLE_LINK211"><font face="Arial"><strong>μg/mL </strong></font></span></span></span></span></span></a><font face="Arial"><strong>MPE for 7-14 days. Dithizone (DTZ) staining was used to detect IPCs derived from EBs in vitro. Mouse monoclonal insulin-proinsulin and monoclonal insulin receptor beta antibodies were used for immunoflourescence. Insulin content from the cells and insulin secreted by differentiated cells in response to concentrations of 5.5 and 25 </strong></font><a name="OLE_LINK4"></a><a name="OLE_LINK3"><span style="mso-bookmark: OLE_LINK4"><font face="Arial"><strong>mM </strong></font></span></a><strong><font face="Arial">glucose were measured using ELISA kits. <u>Results</u>: DTZ-positive cells showed purple-red clusters. immunoflourescence indicated expression of<span dir="rtl"></span></font><span style="FONT-FAMILY: Lotus FONT-SIZE: 11pt mso-ansi-font-size: 9.0pt" dir="rtl"><span dir="rtl"></span> </span><font face="Arial">Beta cell markers (insulin-proinsulin and insulin receptor beta) in these cells. Increasing glucose concentration, caused more insulin to be secreted by differentiated cells. <u>Conclusion</u>s: P19 cells can in the presence of pancreas extract differentiate to cell producing and secreting insulin cells. Differentiated cells can increase insulin secretion in response to increasing glucose medium.</font></strong></p> سلول‌های بنیادی کارسینومای جنینی, عصاره‌ی پانکراس, سلول‌های تولید کننده‌ی انسولین Embryonal carcinoma cells, Pancreatic extract, Insulin-producing cells 395 401 http://ijem.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1524-1&slc_lang=fa&sid=1 marzyeh Ebrahimihafshajani مرضیه ابراهیمی هفشجانی ebrahimi.marzeh@yahoo.com 4000319475328460022413 4000319475328460022413 Yes Shahrekord Univ. of Med. Sci دانشگاه علوم پزشکی Dr. Fariba Esmaeili فریبا اسماعیلی esmail-far@yahoo.com 4000319475328460022414 4000319475328460022414 No Shahrekord University دانشگاه شهرکرد Fariba Houshmand فریبا هوشمند hoshmandf@sinae tumse ac.ir 4000319475328460022415 4000319475328460022415 No Shahrekord Univ. of Med. Sci دانشگاه علوم پزشکی شهرکرد