fa بررسی فعالیت سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی بانوان مبتلا به سندرم تخمدان پلی‌کیستیک در هم‌کشتی با لاین‌های سلول‌های توموری پستان در مقایسه با بانوان سالم زنان Gynecology پژوهشی Original <p dir="RTL" style="margin-right:36.0pt;"><u>مقدمه</u>: سندرم تخمدان پلی‌کیستیک (<span dir="LTR">PCOS</span>) یکی از شایع‌ترین اختلالات غددی در بانوان است. حضور سیستمیک انواع سایتوکاین‌های التهابی، به ویژه <span dir="LTR">TNF-&alpha;</span>، در این مبتلایان دلیل عمده برای وقوع اختلالات ایمونولوژیک است. بسیاری از تظاهرات <span dir="LTR">PCOS</span>، از جمله ناباروری، هایپراندروژنیسم، چاقی و التهاب مزمن، جزو عوامل خطر برای سرطان پستان در نظر گرفته می‌شوند. خطر شکل گیری سرطان پستان در بانوان مبتلا به <span dir="LTR">PCOS</span> در برخی مطالعات اپیدمیولوژیک در حال بررسی است. در این پژوهش، از طریق هم‌کشتی سلول‌های تک‌هسته‌ای خون محیطی (<span dir="LTR">PBMCs</span>) مبتلایان به <span dir="LTR">PCOS</span> با سلول‌های رده توموری پستان، جنبه‌ای از پاسخ ضد توموری این سلول‌ها مورد ارزیابی تجربی و آزمایشگاهی قرار گرفت. <u>مواد و روش‌ها: </u>سلول‌های تک‌هسته‌ای (<span dir="LTR">PBMCs</span>) از 50 نمونه‌ی خون محیطی (در دو گروه مبتلا به <span dir="LTR">PCOS</span> و افراد سالم) به وسیله‌ی گرادیان فایکول جداسازی و تخلیص شدند. رده‌های توموری پستان (<span dir="LTR">MDA-MB-468</span> و <span dir="LTR">MCF-7</span>) به عنوان سلول‌های هدف کشت شدند و در مجاورت با سلول‌های تک‌هسته‌ای، در سیستم هم‌کشتی ترانس‌ول قرار گرفتند. در فواصل زمانی 48 و 72 ساعت پس از هم‌کشتی، تکثیر سلولی با تست تکثیر سلولی بروموداکسی ‌یوریدین بررسی شد. تعیین درصد لنفوسیت‌های<span dir="LTR">CD3+ CD8+</span> به عنوان سلول‌های اجرایی، به وسیله‌ی تکنیک فلوسایتومتری انجام گرفت. <u>یافته‌ها</u>: پاسخ تکثیری <span dir="LTR">PBMCs</span>، پس از 48 ساعت هم‌کشتی با سلول‌های لاین توموری <span dir="LTR">MDA-468</span> (002/0<span dir="LTR">P=</span>) و <span dir="LTR">MCF-7</span> (021/0<span dir="LTR">P=</span>) به طور معنی‌داری در گروه مبتلا به <span dir="LTR">PCOS</span> نسبت به گروه سالم بیشتر بود. تفاوت قابل توجهی در تعداد سلول‌های <span dir="LTR">T CD3+CD8+</span> بین گروه‌های سالم و مبتلا مشاهده نشد (05/0<span dir="LTR">P></span>)، اما پس از 72 ساعت هم‌کشتی، درصد سلول‌های <span dir="LTR">T CD3+CD8+</span> در بیشتر نمونه‌ها افزایش یافت. تفاوت معنی‌داری بین نتایج حاصل از هم‌کشتی با <span dir="LTR">MDA-468</span> و <span dir="LTR">MCF-7</span> در هیچ‌کدام از تست‌ها مشاهده نشد. <u>نتیجه‌گیری</u>: آستانه‌ی تحریک سول‌های تک‌هسته‌ای بانوان مبتلا به <span dir="LTR">PCOS</span> کاهش یافته است و تفاوت بین دو گروه سالم و مبتلا به <span dir="LTR">PCOS</span> از لحاظ قدرت تکثیر سلول‌های اجرایی می‌تواند به دلیل وجود وضعیت التهابی مزمن در این مبتلایان باشد.</p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.0pt;"></p> <p class="Abstract" style="text-align:justify;text-justify:inter-ideograph; direction:ltr;unicode-bidi:embed"><u>Introduction</u>: Polycystic ovary Syndrome (PCOS) is one of the most prevalent endocrinology disorders in women, in whom the state of systemic inflammatory cytokines, especially TNF-&alpha; is the main reason for immunological disturbances. Some PCOS manifestations such as infertility, hyperandrogenism, obesity and chronic inflammation are considered as risk factors for breast cancer. The risk of developing breast cancer in women with PCOS is being investigated in some epidemiological studies. In this research, the ability of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of women with PCOS to develop antitumor response was studied and evaluated using an experimental co-culture approach between PBMCs and breast tumor cell lines. <u>Materials and Methods</u>: PBMCs were isolated from 50 heparinized venous blood samples (patient and healthy groups) by density gradient centrifugation byficoll. Breast cancer cell lines (MDA-MB-468 and MCF-7) were incubated as two target cells and were cultured adjacent to PBMCs in a transwell co-culture system. At different time intervals (48 and 72 hours) after co-culture, the proliferation rate of the effectors cells was evaluated by the BrdU cell proliferation assay. Determination of T CD3+CD8+ lymphocytes was determined by flow cytometry. <u>Results</u>: The proliferation of PBMCs after 48 hours of co-culture with MDA-468 (P=0.002) and MCF-7 (P=0.021) was significantly higher in the PCOS group compared to healthy controls. No pronounced differences were observed in T CD3+CD8+ cell numbers between the PCOS group and healthy controls (P>0.05) although T CD3+CD8+ percentage increased after 72 hours of co-culture in most samples. There was no statistically significant difference between MDA-468 and MCF-7 co-cultures in any of the tests. <u>Conclusion</u>: The stimulation threshold for mononuclear cells was reduced in women with PCOS. Differences between proliferation responses of PCOS and control groups may be caused by a chronic inflammatory condition in these patients.</p> سندرم تخمدان پلی‌کیستیک, سرطان پستان, هم‌کشتی, لنفوسیت‌های C‏D3+ CD8+, BrdU Polycystic ovarian syndrome, Breast cancer, co-culture, CD3+CD8+, BrdU 120 127 http://ijem.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2164-1&slc_lang=fa&sid=1 fatemeh rezayat فاطمه رضایت f_rezayat1991@yahoo.com 4000319475328460029845 4000319475328460029845 No Shahid Beheshti University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی mehri hajiaghaei مهری حاجی آقایی mehri.hajiaghayi@gmail.com 4000319475328460029846 4000319475328460029846 No Shahid Beheshti University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی nariman mosaffa نریمان مصفا yasamaryan@gmail.com 4000319475328460029847 4000319475328460029847 No Shahid Beheshti University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی fahimeh ramezani tehrani فهیمه رمضانی تهرانی fah.tehrani@gmail.com 4000319475328460029848 4000319475328460029848 Yes Research Institute for Endocrine Sciences مرکز علوم غدد درون ریز و متابولیسم Mehrnaz Mesdaghi مهرناز مصداقی mehrnaz_mesdaghi@yahoo.com 4000319475328460029849 4000319475328460029849 No Shahid Beheshti University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی